文献信息

近日，暨南大学生命科学与技术学院生命与健康工程研究院广东省高校功能蛋白研究重点实验室“肿瘤分子生物学”教育部重点实验室、复旦大学上海医学院临床科学研究所中山医院以及清华大学生命学院膜生物学国家重点实验室等单位的研究成果“Targeting hyperactive TGFBR2 for treating MYOCD deficient lung cancer（靶向高活性TGFBR2治疗MYOCD缺陷型肺癌）在杂志Theranostics（IF：11.556）上发表。平生公司的活体CT（Supernova）在论文中提供了重要的小鼠肺部肿瘤图像。

该研究的通讯作者陈良 陈晔光 周倩，第一作者为周倩。

文献背景

目的：肿瘤治疗的临床成功受到耐药性的严重限制，在很大程度上归因于肿瘤抑制基因（TSG）功能的丧失。开发有效的策略来治疗这些肿瘤具有挑战性，但在临床上迫切需要。实验设计：MYOCD是肺癌患者的临床相关TSG。作者的体外和体内数据证实了其抑瘤功能。进一步的分析表明，MYOCD可能抑制肺癌干细胞的干细胞。从机制上讲，MYOCD定位于TGFBR2启动子区域，从而招募PRMT5/MEP50复合物以表观遗传学沉默其转录。结论：缺乏MYOCD的非小细胞肺癌细胞对TGFBR激酶抑制剂（TGFBRi）特别敏感。TGFBRi和干细胞抑制剂与现有药物协同治疗心肌细胞缺陷型肺癌。作者目前的研究表明，MYOCD功能的丧失在肺癌细胞中造成致命缺陷，这可能在临床上得到利用。

实验方法

所有小鼠均被饲养在暨南大学的无病原体环境中。对于转基因Kras^G12D/CC10rtTA小鼠，经鼻将带有MYOCD或puro的慢病毒递送至小鼠肺部。1周后，给小鼠喂食DOX食物，直到CT扫描（Super Nova CT 平生医疗科技有限公司）和处死当天。对于用重组慢病毒共表达Cre和CAS9感染的转基因lsl-KrasG12D小鼠，通过静脉注射感染lsl-Kras^G12D小鼠。根据制造商的协议，用Super Nova CT扫描小鼠。收集小鼠肺进行H＆E染色。为了量化转基因小鼠的肿瘤负担，作者在显微镜下计算了H＆E切片中所有肿瘤区域的相对肿瘤面积和肿瘤数。

实验结果：

计算机断层扫描成像（CT）显示，KC+C小鼠的两肺肿瘤负担沉重（图1H）。病理分析显示低分化肺腺癌具有弥漫性支气管腺癌的特征。与此形成鲜明对比的是，KC+M小鼠在此阶段看起来正常，CT成像显示肺癌负担显著降低（图1H）。一致地，病理检查显示这些小鼠肺部的肿瘤负担明显减轻（图1I-1J）。这些数据有力地证明，MYOCD的过度表达抑制了体内原位肺癌的发展。

（H） 在KC小鼠模型中，MYOCD的过度表达减缓了肺肿瘤的发生。在CT扫描之前，给KC+C和KC+M小鼠喂食DOX食物约12周。肺癌小鼠的CT图像KC+C小鼠（n=3）和KC+M小鼠（n=3）（左）；肿瘤负荷的量化（右图）。（I） 从KC+C和KC+M小鼠获得的肺组织H&E染色的代表性图像。（J） 统计平均肿瘤数（左）和相对肿瘤面积（右）。（K） MYOCD基因敲除促进lsl-KrasG12D小鼠肺肿瘤的发生。K-sgTD小鼠（n=10）和肺癌小鼠（n=10）的肺MRI图像（左）；肿瘤负荷的量化（右图）。（五十） K-sgTD和K-_sgMYOCD肺组织H&E染色的代表性图像。（M） 平均肿瘤数量（左图）和相对肿瘤面积（右图）的量化。

在确认SB525334、WYC209和曲美替尼联合治疗异种移植小鼠模型中的K+/M肺癌的有效性和安全性后，作者继续在转基因小鼠原位肺癌模型上测试该治疗方案。为此，作者生成了一组KrasG12D \/MYOCD-\/-（K-sgMYOCD，详见图1K-M）转基因小鼠，并在通过CT扫描记录肺癌后，将其随机用于上述组合方案的治疗。引人注目的是，CT扫描显示，使用这种组合治疗14天的小鼠肿瘤显著缩小（图6D）。病理检查显示，在联合治疗小鼠的肺中，残留的肿瘤结节具有明显的肺泡壁增厚和纤维化，表明正在愈合（图6E）。根据作者的假设，作者发现K-sgTD小鼠（TD番茄的lsl Kras G12D小鼠敲除，作为对照，见图1K-M）对这种治疗相对较不敏感（图6D-E）。综上所述，作者的结果表明TGFBR抑制剂和CSC干细胞抑制剂可能与当前治疗心肌细胞缺乏型肺癌的药物协同作用。

D-E）SB525334（1 mg/kg/天），WYC209（1 mg/kg/天）与曲美替尼（1 mg/kg/天）协同收缩KRAS^G12D/MYOCD^-/-小鼠的肺肿瘤。（D） 经载体（Veh.）或联合治疗（SB.+WYC.；WYC.+SB.+Trans.）处理的K-sgTD和K-sgMYOCD小鼠肺CT图像（上图）和CT图像肿瘤负荷的量化（下图）。（E） 从Veh.和Com.KRAS^G12D/MYOCD^-/-小鼠获得的肺组织H＆E染色的代表性图像（上图），统计肿瘤数量和肿瘤面积（下图）。

文献结论：

在作者的研究中，作者已经确凿地表明，MYOCD将PRMT5/MEP50组蛋白甲基转移酶复合物招募到TGFBR2基因启动子区域，从而表观遗传沉默TGFBR2的转录。目前，针对表观遗传读写器的小分子抑制剂已经开发出来。这将是有趣的测试这些试剂是否可以协同治疗非小细胞肺癌患者心肌细胞缺乏症与现有的药物在临床上。综上所述，作者提出了TSGs功能缺失突变造成致命缺陷的观点，可用于癌症靶向治疗。

使用设备：

Micro CT（型号：Super Nova^®）（平生医疗科技）

影像软件：Avatar（平生医疗科技）