文献信息

联勤保障部队第九四〇医院基础医学实验室、甘肃省干细胞与基因药物重点实验室等单位的研究成果“松脂醇二葡萄糖苷对青年大鼠骨代谢的影响”在杂志《中国药理学通报》上发表。平生公司的离活一体CT(NEMO)在论文中提供了重要大鼠股骨图像和定量分析。

该研究的通讯作者为谢高倩，第一作者为牛廷献。

文献摘要

目的：研究松脂醇二葡萄糖苷(Pinoresinol Diglucoside)对青年大鼠骨代谢的影响。

方法：将实验大鼠按随机数字表达法分为Control组、PDG-25组和PDG-50组。PDG-25组和PDG-50组每天分别按25mg.kg-1和50mg.kg-1的剂量灌服PDG，Control组每天灌服等体积蒸馏水。6周后处死所有大鼠，取脏器、血清、股骨、胫骨和椎骨，用于组织病理学检测、离体骨密度检测、Micro CT成像分析、血清生化指标检测、双荧光标记观察以及股骨骨组织蛋白表达分析。

结果：各组大鼠主要脏器的组织病理学结果均未见明显异常；与Control组相比，PDG-25组和PDG-50组的离体骨密度均明显增高；Micro CT结果显示，PDG-50组的骨体积分数、骨小梁数以及骨小梁厚度均明显升高，但骨小梁分离度明显下降；PDG-25组和PDG-50组荧光标记间距明显增大；PDG-25组和PDG-50组组血清OPG含量明显提高，但RANKL含量明显降低；PDG-25组和PDG-50组BMP-2、Runx-2、OSX和OPG表达量明显增多，RANK表达量明显减少。

结论: 25mg.kg-1和50mg.kg-1的PDG可能通过促进骨形成和抑制骨吸收来提高青年大鼠骨质量与骨强度。

实验方法

动物分组与给药

将实验大鼠采用随机数字表法分为3组，每组10只，分别为Control组、PDG-25组和PDG-50组。低剂量给药组(PDG-25)灌胃25mg.kg-1PDG，高剂量给药组(PDG-50)灌胃 50mg.kg-1 PDG，对照组(Control)灌胃等体积蒸馏水。每周周一到周六上午灌胃，周日不灌胃。持续灌胃6周后，取材并开展各项指标检测。

Micro CT分析

从每组新鲜剥离的左侧股骨中随机取5根固定在4%的多聚甲醛中。Micro CT扫描条件：电压70Kv，电流200μA。用Cruiser软件扫描获得原始图像并得到纵截面最大剖面图，选择骨骺线下1.5-3.5mm区域通过Avatar系统重建，得到骨小梁立体图以及松质骨的骨形态参数。

实验结果

股骨Micro CT成像分析股骨Micro CT分析得到的最大剖面图显示，PDG-25组和PDG-50组松质骨骨小梁数量明显增多(Fig 3)。重建得到的3D效果图可以看出，PDG-25组和PDG-50组骨小梁更加密集且骨小梁间距更小(Fig4)。如Fig5 所示，PDG-50组骨体积分数(BS/TV) 和 骨 小 梁 数(Tb.N)明显高于Control组(P＜0.01) 、骨小梁厚度（Tb.Th）明显高于Control组(P＜0.05) ，且骨小梁分离度(Tb.Sp)极明显低于Control组(P＜0.01)。结果提示PDG可促进青年大鼠骨形成从而增强骨微结构。

Fig 3 Maximum profile of Micro CT imaging analysis of femur in each group

Fig 4 3D reconstruction map of Micro CT imaging analysis of femur in each group

Fig 5 Quantitative analysis of Micro CT indexes of femoral cancellous bone in each group (x̄ ± s, n = 5)  * P < 0.05,  * *P < 0.01 us control

文献结论

综上所述，本实验结果初步显示，PDG可明显提高青年大鼠的骨密度，因而有可能通过提高峰值骨量而预防大鼠骨质疏松，且其作用机制可能与影响骨形成和骨吸收有关。这些结果表明，PDG很可能是杜仲抗骨质疏松的有效成分，应具有开发为抗骨质疏松药物的潜力。但此种作用与其他已报道能提高峰值骨密度的天然产物或药物相比有何优势，PDG对于由切除卵巢引起的绝经后骨质疏松有无预防或治疗作用，其作用机制如何，与其他药物相比有何优势等等，该课题组接下来将对这些问题予以研究。

使用设备

                                  Micro CT (型号：NEMO) (平生医疗科技)

                                          影像软件：Avatar（平生医疗科技）